傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

SCC15人舌鱗癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基CEpiCM 小鼠NADPH氧化酶1(NOX1)ELISA試劑盒 SMC1： 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白1抗體 MFC 小鼠胃癌細(xì)胞

Promocell C-26501 Follicle Dermal Papilla CellGrowth Medium, 真皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml 小鼠NADH脫氫酶1(ND1)ELISA試劑盒 SMC2： 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白2抗體 CL-0277HCC94(人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化))5×106cells/瓶×2

NRK-52E(大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠M型肌酸激酶(CKM)ELISA試劑盒 SMC4： 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白4抗體 人肺成纖維細(xì)胞 (HPF)( 5×105 )

人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN 小鼠Misato同源物1(MSTO1)ELISA試劑盒 SMC5： 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白5抗體 人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292 大鼠表皮黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 小鼠Mdm2小鼠p53結(jié)合蛋白同源物(MDM2)ELISA試劑盒 SMC6： 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白6抗體 人皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-HSF-1

食管癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒 5-HT (Rabbit 5-Hydroxytryptamine)  兔子5羥色胺 96T

MLX： 轉(zhuǎn)化因子樣蛋白4抗體 小鼠癌細(xì)胞;CCC-Ca761-03

HAN(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 雪旺細(xì)胞培養(yǎng)基SCM 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA 試劑盒 Beta-EP (Rabbit Beta-Endorphin)  兔子β內(nèi)啡肽 96T

MT-ND5： NADH復(fù)合體5抗體 CM-R1鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒 Mouse neurofilament protein,NF  小鼠神經(jīng)絲蛋白 96T

SCC15人舌鱗癌細(xì)胞SF-295細(xì)胞，人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞 毛霉 人腸平滑肌細(xì)胞RNAHISMC miRNA5 μg 人抗核仁抗體(ANA)ELISA 試劑盒 Kir6.2 peptide ATP敏感性通道亞基kir6.2抗原 0.5mg

HIRIP3： HIRA相互作用蛋白3抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人胰腺癌細(xì)胞;AsPC-1 人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA 試劑盒 AVPR2(arginine vasopressin receptor 2) 精酸加壓素受體2抗原 0.5mg

HOOK1： HOOK1蛋白抗體 人胚肺細(xì)胞系;KuMA

HCC827(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前胃癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1 人抗核抗體(ANA)ELISA 試劑盒 Aurora B 光激酶B抗原 0.5mg