傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

MNT-1人黑色素瘤細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠p53(p53)ELISA 試劑盒 SLCO1C1： 溶質(zhì)載體家族蛋白21成員1C1抗體 人胚肺成纖維細胞;HFL1

HONE1細胞，人鼻咽癌細胞 小鼠淋巴瘤細胞,EL4.IL-2細胞 CM-H030人外周血白細胞培養(yǎng)基100mL 小鼠P21蛋白(P21)ELISA試劑盒 SLFN14： Schlafen家族14抗體 MMP8 Others Human 人 MMP-8 / CLG1 人細胞裂解液 (陽性對照)

成纖維細胞培養(yǎng)基-2FM-2-prf 小鼠Osterix蛋白(OSX)ELISA試劑盒 Slit1： 多重表皮生長因子樣蛋白4抗體 Lewis 小鼠肺癌細胞

Promocell C-26040 Placeal Epithelial CellGrowth Medium, 胎盤上皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml 小鼠opiorphin(opiorphin)ELISA試劑盒 SLIT2/Slil3： 神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體 CL-0304PC-3M(人前列腺癌細胞)5×106cells/瓶×2

NIH/3T3(小鼠胚胎細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)ELISA試劑盒 Slitrk1： 神經(jīng)突出相關(guān)蛋白Slitrk1抗體 人支氣管上皮細胞(HBEpiC)(5×105 )

Mast Cell Chymase： 肥大細胞類1抗體 Hela, 人細胞系 小鼠成纖維細胞,3T3TK細胞 SPA-A1(肺腺癌細胞)

SIGLEC5 Others Human 人 SIGLEC5 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠誘導型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 PGE2 (Rabbit Prostaglandin E2)  兔子前列腺素E2 96T

Metronidazole(1C2)： 單克隆抗體 小鼠子細胞;U14

RH-35大鼠肝癌細胞 RH-35 rat hepatoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS 大鼠誘導型合成酶(iNOS)ELISA 試劑盒 FSH  魚促卵泡素 96T

MrpL12： 線粒體核糖體蛋白L12抗體 FGFR2 Others Human 人 FGFR2 / CD332 人細胞裂解液 (陽性對照)

MNT-1人黑色素瘤細胞HBZY-1(大鼠腎小球系膜細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1 人抗環(huán)胍酸肽抗體(CCP)ELISA 試劑盒 ATF1 (Activating Transcription Factor1) 活化復制因子1 0.5mg

Hexokinase 1： 己糖激酶1抗體 人膀胱平滑肌細胞RNAHBdSMC miRNA5 μg

SC-1(小鼠胚胎細胞) 5×106cells/瓶×2 人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)ELISA 試劑盒 NPS/Neuropeptide S 神經(jīng)肽S 0.5ml

Hexokinase 2： 己糖激酶2抗體 HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)

胎兒骨髓間質(zhì)干細胞 Fetal bone marrow mesenchymal stem cells 人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV IgM)ELISA試劑盒 NKB (Neurokinins B) 神經(jīng)B(抗原) 0.5mg