傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

SNU-182人肝癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Promocell C-25215 Hepatocyte Basal Medium (prf), 肝細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基，無(wú)酚紅 500ml 小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 Phospho-SRF (Ser103)： 0酸化血清應(yīng)答因子抗體 BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細(xì)胞株

KLE(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA 試劑盒 Phospho-SRF (Ser77)： 0酸化血清應(yīng)答因子抗體 人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞(HA-sp)(1×106)

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-3A1 小鼠白介素12(IL-12)ELISA試劑盒 phospho-STAT1 (Ser727)： 0酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7 大鼠膀胱上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

SLAMF1 Others Rat 大鼠 CD150 / SLAM / SLAMF1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 小鼠白介素11受體α(IL11Rα)ELISA試劑盒 phospho-STAT1 (Tyr701)： 0酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH2

QGY-7703細(xì)胞，人肝癌細(xì)胞 人羊膜細(xì)胞,WISH細(xì)胞 大鼠骨肉瘤細(xì)胞;UMR-106 小鼠白介素11(IL11)ELISA試劑盒 Phospho-Stat2 (Tyr690)： 0酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體 FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

LRRC4B： 神經(jīng)突觸蛋白NGL3抗體 CL-0033BGC823(人胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

FGF18 Protein Human  FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標(biāo)簽) 大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒 Mouse IgG/Cy5.5 熒光素Cy5.5標(biāo)記小鼠IgG(細(xì)胞流式同型對(duì)照) 0.1ml

LCA5L： 致盲基因LCA5樣蛋白抗體 CHEK1 Others Human 人 CHK1 / CHEK1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大鼠小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA 試劑盒 OVA/PE 熒光素PE標(biāo)記雞卵白蛋白 0.1ml

LCA5： 致盲基因LCA5蛋白抗體 GH3, 大鼠垂體生長(zhǎng)激素腺瘤 纖維肉瘤細(xì)胞,HT1080細(xì)胞 Jurkat,Clone E6-1(T 淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)

SNU-182人肝癌細(xì)胞HDAC7： 組蛋白去乙?；?span>7抗體 人胚腎細(xì)胞;293FT

PLC/PRF/5(人肝癌亞力山大細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人顆粒酶B(Gzms-B)ELISA 試劑盒 DDC (DOPA decarboxylase) 多巴胺脫羧酶(抗原) 0.5mg

phospho-HDAC7 (Ser358)： 0酸化組蛋白去乙?；?span>7抗體 FSTL5 Others Human 人 FSTL5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 人顆粒酶A(Gzms-A)ELISA 試劑盒 EGFR- V III 人表皮生長(zhǎng)因子受體-8(多肽片斷抗原) 0.5mg

HDAC8： 組蛋白去乙?；?span>8抗體 豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL4 幼倉(cāng)鼠腎細(xì)胞，BHK細(xì)胞 DCS細(xì)胞，小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞