NCI-H1650人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GRASP： 一般受體0酸肌醇相關(guān)支架蛋白1抗體 大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1) 膠質(zhì)瘤細(xì)胞，SHG-44細(xì)胞 W6/32細(xì)胞，小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞

FKBP14 Others Human 人 FKBP14 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人腺相關(guān)病毒(AAV)ELISA 試劑盒 IgM/AP 堿性0酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml

GRIK5： 谷酸受體紅藻酸離子5抗體 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-acf

HEC-1-A細(xì)胞，人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 鼠雜交骨髓瘤細(xì)胞,K6H6/B5細(xì)胞 新生兒表皮角化細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 人腺苷脫酶(ADA)ELISA 試劑盒 IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗羊IgM 2ml

GODZ： 棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶GODZ抗體 CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

Neuritin： 轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體 狗腎細(xì)胞;Super Tube

IL17A Protein Canine 重組狗 IL17 / IL17A 蛋白 大鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒 PKB(Mouse protein kinase B)  小鼠蛋白激酶B 96T

NPIP-like protein 1： NPIP樣蛋白1抗體 PDK1 Others Human 人 PDK-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠趨化因子(FK)ELISA試劑盒 KLK 11(Human Kallikrein 11)  人11 96T

Nicastrin： 老年性癡呆蛋白APH2抗體 CTLL-2細(xì)胞，T細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,JF-305細(xì)胞 CM-M016小鼠胰腺星狀細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

NCI-H1650人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞INSL3： 胰島素樣蛋白3抗體 CAMK4 Others Mouse 小鼠 CAMK4 / CaMKIV 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人脈絡(luò)膜血管細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人25-羥基維生3(25OH Vitamin D3)ELISA試劑盒 ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相關(guān)基因(抗原) 0.5mg

IRE1a： 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體 小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) 小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞，NOR-10細(xì)胞 SAC-IIC3(腹水瘤細(xì)胞)

JAM2 Others Rat 大鼠 JAM-2 / JAM-B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人25-羥基維生3(25OH Vitamin D3)ELISA試劑盒 Fibronectin (FN) 纖維連結(jié)蛋白(多肽抗原) 0.5mg

rhIL-18：18抗體 大鼠癌細(xì)胞;SHZ-88

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。