SK-BR-3人乳腺腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Ghrelin Receptor： 腦腸肽受體抗體 大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E 紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞，HEL299細(xì)胞 PT67細(xì)胞，鼠逆轉(zhuǎn)錄酶病毒包裝細(xì)胞

GPNMB Others Human 人 GPNMB / Osteoactivin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人α1(Thymosin α1)ELISA 試劑盒 Rabbit Anti-dog IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml

GRC5： GRC5蛋白抗體 前脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基PADM-prf

OVAC細(xì)胞，人卵巢癌細(xì)胞 猴腎C細(xì)胞,M145細(xì)胞 視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 人(Thymosin)ELISA 試劑盒 Rabbit Anti-dog IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml

Gbx1： 腸和大腦特定同源蛋白1抗體 LRP1 Others Human 人 LRP1 / A2MR / CD91 (aa 786-1165) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

NDUFA8： NADH脫氫酶α家族8抗體 豬腎細(xì)胞;PK-15

白細(xì)胞介素-17超家族 大鼠熱休克蛋白β2(HSPβ2)ELISA試劑盒 Pro-ANP(Mouse Pro Atrial Natriuretic Peptide)  小鼠前心肽 96T

NDUFV1： NADH脫氫酶黃素蛋白1抗體 CFR Others Rat 大鼠 CFR / CFR-alpha 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠熱休克蛋白90-alpha(Hsp90aa1/Hsp86/Hspca)ELISA試劑盒 8-iso-PG  大鼠8異前列腺素 96T

NDUFV2： NADH脫氫酶黃素蛋白2抗體 R 1610細(xì)胞，中國(guó)倉(cāng)鼠體細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,PC-3細(xì)胞 CM-R101大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

SK-BR-3人乳腺腺癌細(xì)胞人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA 試劑盒 CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer) CD147(抗原) 0.5mg

phospho-IKK beta(S474)： 0酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪 人骨髓橫紋肌肉癌細(xì)胞，SJCRH30[RC13;RMS 13;SJRH30]細(xì)胞 MFC(胃癌細(xì)胞)

FCER1A Others Human 人 FcERI / FCER1A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA 試劑盒 CD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原 0.5mg

phospho-IKK beta(Ser476)： 0酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24

3T3NIH細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞 HUVEC(人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞) 小鼠垂體瘤細(xì)胞;GT1-1 人8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA 試劑盒 CD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator) B 和 T 淋巴細(xì)胞衰減蛋白(抗原) 0.5mg