HELF人胚肺成纖維細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Phospho-FLT3 (Tyr842)： 0酸化FMS樣酪酸激酶3 0.1ml

細胞角蛋白19抗體 人無色素睫狀上皮細胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μg

CCC-HEK-1細胞，人胚腎二倍體細胞 鼠逆轉錄酶病毒包裝細胞,PT67細胞 CL-0398NCI-H2452(人間皮瘤細胞)5×106cells/瓶×2 兔子D二聚體(D2D)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

Phospho-FLT3 (Tyr969)： 0酸化FMS樣酪酸激酶3 0.1ml

細胞角蛋白16抗體 EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細胞裂解液 (陽性對照)

Myotilin： 肌收縮蛋白MYOT抗體 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A5

NCI-H524(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 HUVEC(人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞) 大鼠細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒 sE-selectin(Human soluble E-selectin)  人可溶性E選擇素 96T

phospho-MAP4K4(Ser631)： 0酸化原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3

IL1B Protein Mouse 重組小鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 大鼠細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 sICAM-1(Human Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1)  人可溶性細胞間粘附分子1 96T

RNF59： 環(huán)指蛋白59抗體 PLK1 Others Mouse 小鼠 PLK1 / PLK-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

HELF人胚肺成纖維細胞Calu-6細胞，人退行性癌細胞 克雷伯肺炎桿菌 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21 人大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA 試劑盒 HSP47(Heat shock protein-47) 熱休克蛋白-47抗原 0.5mg

Hepatocyte(2H5)： 人肝細胞單克隆抗體 ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 人細胞裂解液 (陽性對照)

雜交瘤(B類);C3110D2E11 人大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA 試劑盒 HSP-90 Alpha(Heat Shock Protein 90 Alpha ) 熱休克蛋白90α抗體 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0908

NCI-H1299(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 人大腸菌素(colicin)ELISA 試劑盒 HSP-105 (heat sock protein-105) 熱休克蛋白HSP105抗原 0.5mg

Hepcidin-25： 鐵調(diào)節(jié)蛋白/鐵調(diào)素抗體 黑色素細胞培養(yǎng)基MelM

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。