HFL-1人胚肺成纖維細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用。可根據(jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

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HUASMC-c 人臍動脈平滑肌細胞(HUASMC) 500,000cells 胃黏膜上皮Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠白介素1β(IL1B)ELISA試劑盒 IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

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SNU-638人胃癌細胞 Human gasic cancer cells SNU-638 1640+10% FBS 大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒 LDL  大鼠低密度脂蛋白 96T

MAD2： 有絲分裂阻滯缺陷蛋白2抗體 PDCD1 Others Mouse 小鼠 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照)

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細胞 大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA 試劑盒 Mouse Beta-catenin, Beta-cat  小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白 96T

beta 2 Microglobulin： β2微球蛋白抗體 小鼠黑色素瘤瘤株;B16

NCI-H2170(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(胚肺細胞) 大鼠血管非炎性蛋白1(VNN1)ELISA試劑盒 Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP  小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽 96T

HFL-1人胚肺成纖維細胞HEXO： 3'-5'外切酶1蛋白抗體 牛腎細胞;MDBK(NBL-1) 人胃癌細胞，NCI-N87細胞 NS-1細胞，小鼠骨髓瘤細胞

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MuM-2B細胞，人眼脈絡黑色素瘤細胞 光孢短柄帚霉 野生型人c-kit受體細胞株;A7d 人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA 試劑盒 Nadrin peptide 發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白多肽抗原 0.5mg

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小耳豬腎細胞;SEPfk 人肝癌抗原(PHC)ELISA 試劑盒 E2F1 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1 0.5mg