NCI-H292人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FAAH2： 脂肪酸酰胺水解酶2抗體 GPA33 Others Mouse 小鼠 GPA33 / Glycoprotein A33 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒 IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml

Frizzled 7： 卷曲蛋白FZD7抗體 細(xì)胞名稱 種屬

HVMF-c 人類絨毛間質(zhì)成纖維細(xì)胞(HVMF) 500,000cells 腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 IgG/FITC FITC標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.3ml

FMDV Polyprotein (VPg2 protein)： 口蹄疫病毒A型抗體 CM-H136人牙周膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

MLL5： 髓系/淋巴混合譜系白血病蛋白5抗體 DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞 大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR3)ELISA試劑盒 F1+2 (Rabbit prothrombin fragment 1+2)  兔原片段F1+2 96T

MPV17： T淋巴細(xì)胞成熟相關(guān)蛋白抗體 T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795

NCI-H1688(人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 3T6-Swiss albino(胚胎成纖維細(xì)胞) 大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR2)ELISA試劑盒 Ricinus communis agglutinin,RCA  蓖麻凝集素 96T

cblA： 甲基尿癥cblA抗體 瘤牛皮膚細(xì)胞;BIN-S1

NCI-H292人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)HIP55/DBNL： 宮頸黏液蛋白相關(guān)蛋白抗體 水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7) T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞，Jurkat,Clone E6-1細(xì)胞 MPC-83細(xì)胞，小鼠胰腺腺泡細(xì)胞癌細(xì)胞

RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人孤腓肽(OFQ/N)ELISA 試劑盒 Cyclin A 周期素A抗原 0.5mg

H3N8 hemagglutinin： 流感病毒H3N8血凝素抗體 CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

UM細(xì)胞，人葡萄膜黑色素細(xì)胞 土曲霉 人胃癌細(xì)胞;MKN-45 人鉤端抗體(Lep-Ab)ELISA試劑盒 Cyclin B1 周期素B1抗原 0.5mg

H3N7 hemagglutinin： 流感病毒H3N7血凝素抗體 COCH Others Human 人 COCH / Cochlin ( isoform short ) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。